流式细胞仪：液路保养与检测异常排查要点

流式细胞仪（FCM）是在细胞水平上进行高速多参数分析的仪器，由液流系统、光学系统、电子检测系统与数据分析软件组成，可对细胞群体的大小、颗粒度与荧光信号进行定量，广泛用于免疫表型分析、细胞周期与功能研究。其核心原理是让单细胞列队通过检测区域，因此液路与光路的稳定性直接决定数据质量。

常见故障如何排查？

• 流速异常或不出液：先检查鞘液余量与液路气泡，再排查样品针与流通池是否堵塞。
• 信号突然下降：多因激光功率衰减、滤光片位置偏移或检测器增益设置被改动，需按校准程序重新验证。
• 群体分群不明显：常见于染色不当、补偿设置错误或细胞活性差，应检查前处理与上机浓度。
• 数据重复性差：样本聚集体、进样速度不当或液路污染都会造成，需过滤样本并规范上机操作。

日常如何维护保养？

• 每日开机运行校准微球，确认仪器状态稳定后再测样。
• 定期清洗样品针与流通池，防止交叉污染。
• 鞘液与清洗液按厂家要求过滤除菌，避免微生物滋生堵塞液路。
• 光学平台防尘防振，激光与滤光片由专业人员按周期检查。
• 及时清理废液，保持液路密闭与实验环境卫生。

使用有哪些注意事项？

上机前确认样本已分散为单细胞悬液并过滤，浓度控制在合适范围。光路校准周期、检测器参数设置与质控标准，请以原厂说明书与现行有效标准为准；不同型号（如常见的 FACSCALIBUR 等）在光路布局与软件功能上存在差异，本文仅作通用说明。

常见问题

问：流式细胞仪测样时细胞团块多、容易堵针，怎么处理？

答：先从前处理入手：充分吹打分散样本，用合适孔径滤网过滤，黏稠样本可加酶解聚处理。上机时适当降低进样速度；若已经堵针，按规程执行反冲洗与针外壁清洗，切勿强行加压，以免损伤液路。

问：同一样品两次检测结果差异大，可能是什么原因？

答：先确认两次仪器状态是否一致，用校准微球验证流速与信号稳定性；再核对样本是否沉降分层、补偿与阈值设置是否相同。排除操作因素后，应检查液路是否残留气泡或轻微堵塞，并按规程重新校准。

— 本文由仪服通（成都）科技有限公司技术服务团队整理，供实验室仪器管理参考。如需具体仪器的维修、搬迁、培训或 3Q 认证服务，欢迎联系我们。—

本页面最后更新：2023-07-03　·　内容仅描述通用做法，具体参数请以仪器原厂说明书与现行有效版本的国家/行业标准为准。