BD FACSCALIBUR 流式细胞仪液流与荧光信号异常排查

BD FACSCALIBUR 是基于液流聚焦与激光散射、荧光检测的流式细胞仪，用于细胞表型、细胞周期与凋亡等分析。样品在鞘液包裹下逐个通过激光检测区，信号质量取决于液流稳定、激光与光学系统及校准是否到位。

这台流式细胞仪信号异常如何排查

按"液流系统—激光—光学—鞘液—样本"的真实结构组织：

• 液流不稳或堵塞：鞘液污染、样本未过滤含团块、流路久未冲洗；更换过滤鞘液、过滤样本、执行冲洗程序。
• 荧光信号弱或串色：检测电压设置不当、荧光补偿未做、荧光素搭配冲突；用校准微球设定电压并做补偿。
• 计数偏差或事件少：流速不当、微孔堵塞、校准微球失效；规范流速、冲洗、更换校准品。
• 无法获取事件：激光未就绪、滤光片错位、样本浓度过低；检查激光状态与滤光片。

日常维护需要注意哪些环节

• 每日开机与关机执行冲洗，保持流路通畅。
• 鞘液与清洗液过滤后使用，废液及时清空。
• 定期用校准微球做质控，记录电压与补偿。
• 激光与光学窗按周期清洁，避免灰尘影响。
• 样本前处理规范过滤，降低堵孔概率。

操作中要避开哪些使用误区

• 不随意调高检测电压"压低"串色，应先做补偿与荧光素规划。
• 不用未过滤样本，避免反复堵孔损伤流路。
• 不编灵敏度或分辨率数据，性能以校准为准。
• 具体流速、电压与补偿，以仪器原厂说明书与现行有效标准为准。

常见问题

问：FACSCALIBUR 堵孔了，冲洗后仍不通怎么办？

答：先确认鞘液与样本均已过滤、无团块；若自动冲洗无效，可执行更强的清洗程序并静置后复冲。仍不通时检查废液管路与微孔状态，必要时联系维护，不强行加大压力以免损伤流路。

问：流式细胞仪做补偿一定要用单染管吗？

答：是的，准确补偿依赖每种荧光素的单染对照，用以校正通道间串色；若省略单染管直接分析，会导致群体误判。电压与补偿应结合校准微球与单染管一并设定。

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本页面最后更新：2026-10-19　·　内容仅描述通用做法，具体参数请以仪器原厂说明书与现行有效版本的国家/行业标准为准。